1. 培育箱消毒:先用純水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就能夠拉!留意周圍環(huán)境的清洗就不會(huì)那么簡(jiǎn)單污染的拉!
2. 我的經(jīng)驗(yàn)是在彌補(bǔ)水時(shí)**佳把水加熱一下,到達(dá)培育箱的溫度。
3. 這么早就養(yǎng)細(xì)胞了,咱們這里通常是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1份額熏一遍。留意要是熏的話千萬留意混合以后馬上脫離,然后密閉細(xì)胞培育室,滋味很影響的。**佳在養(yǎng)細(xì)胞前消毒,否則,的確沒地方放細(xì)胞。
4. 咱們的辦法比較簡(jiǎn)單,先用75%酒精擦洗內(nèi)壁,通風(fēng)10分鐘,紫外線照耀30分鐘即可。
5. 咱們的通常處理是先用75%的酒精擦洗內(nèi)壁,然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個(gè)黑夜,然后通風(fēng)一整天(一同翻開紫外線照耀)。
6. 咱們是把培育箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩(shī)樂氏擦一遍,再紫外照一夜,作用極好,別的的請(qǐng)高手指導(dǎo)。
7. 熏蒸后吹**是肯定不行的,**起碼要一個(gè)星期才能夠讓甲醛散盡,要不細(xì)胞長(zhǎng)欠好的
8. 有的培育箱能加熱內(nèi)壁到90度,也有的帶有紫外線功用。慣例應(yīng)當(dāng)每周用酒精擦洗內(nèi)部一次。詳細(xì)的操作請(qǐng)參閱培育箱的手冊(cè),或著咨詢培育箱技術(shù)支持。運(yùn)用消毒劑應(yīng)當(dāng)心,培育箱內(nèi)有檢查溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機(jī)溶劑有也許損壞某些器件,請(qǐng)慎用。別的,揮發(fā)性的甲醛有毒,易燃、易爆。假如在培育箱內(nèi)殘留甲醛的話,細(xì)胞會(huì)死光光哦(我實(shí)驗(yàn)室的真實(shí)故事)??倸w,先看培育箱手冊(cè),再聯(lián)絡(luò)技術(shù)支持,方可萬無一失啊。9. 慣例**佳啥也不放!硫酸銅的作用是按捺細(xì)菌成長(zhǎng)(但大都用在處理污染的孔板)。由于如今的孵箱都有抑菌功用。
10. 咱們實(shí)驗(yàn)室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)參加適當(dāng)?shù)臏缇p蒸水或許生理鹽水.再加少數(shù)新潔爾滅,濃度不要緊.細(xì)胞養(yǎng)的都能夠.
11. 我主張
1 **佳先把培育箱完全消毒.詳細(xì)辦法也是用75%的酒精好好清洗培育箱. 2,操作時(shí)嚴(yán)厲依照無菌操作的準(zhǔn)則
3 我認(rèn)為雙抗的替換疑問卻是不大,除非你正在運(yùn)用的是污染的抗生素. 4 盡量減少觀看細(xì)胞的次數(shù)及時(shí)刻.
12. 咱們實(shí)驗(yàn)室清洗培育箱的辦法:用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75%酒精擦洗一遍
13. 這是咱們實(shí)驗(yàn)室慣例的培育箱消毒辦法(通常一個(gè)月一次),期望對(duì)你會(huì)有用
14. shou要把培育箱里的東西悉數(shù)取出,放盡培育箱里的三蒸水;重復(fù)用三蒸水沖刷培育箱,然后用75%酒精擦3遍,以后再用三蒸水擦3遍;培育箱里的架子先用自來水重復(fù)沖刷,然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照耀消毒1 h左右;**終將三蒸水(里邊應(yīng)加少數(shù)染料)參加培育箱,將消毒好的架子放入即
15. 培育箱應(yīng)放置無菌室,水中應(yīng)加適當(dāng)?shù)寞B氮鈉(防腐)或許硫酸銅,留意空氣消毒.
16. 消毒培育箱的常用辦法有兩種:
把細(xì)胞移出,記住擰緊瓶蓋,通常放在超凈臺(tái)內(nèi),室溫一兩個(gè)小時(shí),疑問不大。如培育室有空調(diào),也可將空調(diào)翻開。然后先用75%酒精棉球擦洗培育箱內(nèi)壁,留意不要漏掉任何一個(gè)旮旯。擦洗兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內(nèi)壁,可多清洗幾遍。**終用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內(nèi)壁再擦洗一遍即可。悉數(shù)操作沒有必要在無菌條件下。**終可在培育箱的水里加上亞甲基藍(lán),混勻即可。亞甲基藍(lán)溶液可起到必定的抑菌滅菌作用。待培育箱內(nèi)酒精簡(jiǎn)直揮發(fā)完時(shí),將細(xì)胞放入培育箱中。
還有一種辦法即是直接用蒸餾水清洗完,然后再用紫外燈照(**佳是那種培育箱里就帶有紫外燈的,就便利多了。)
通常培育箱是需求定時(shí)清洗的,咱們室是1-2月清洗一次,當(dāng)然這要依據(jù)細(xì)胞養(yǎng)的多少和培育箱運(yùn)用的頻頻程度來決議的。
17. 咱們實(shí)驗(yàn)室液發(fā)作過相似事情,我把咱們處理進(jìn)程通知你,期望對(duì)你有協(xié)助:
shou要消毒培育箱,假如你們有兩個(gè)或以上培育箱就好辦了,假如只要一個(gè)且還有許多別的細(xì)胞就費(fèi)事點(diǎn)。只能暫時(shí)的放在超凈臺(tái)上。詳細(xì)如下,正午將空調(diào)溫度打到**高(也只要31度),超凈臺(tái)開紫外。下午早點(diǎn)來關(guān)紫外,將細(xì)胞培育瓶蓋蓋緊,轉(zhuǎn)到超凈臺(tái)內(nèi),用75%酒精擦洗培育箱,再用無臭氧型可移動(dòng)的紫外等照耀半小時(shí),然后將細(xì)胞放回,松開蓋口即可(切記CO2瓶子閥門要關(guān)緊啊,否則氣全跑光了)。
通常實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)了霉菌的話,肯定要悉數(shù)消毒。
再消毒實(shí)驗(yàn)室,先把室內(nèi)空諧和消毒柜過濾網(wǎng)都拆下清洗,在錐形瓶?jī)?nèi)加點(diǎn)高錳酸鉀,放在實(shí)驗(yàn)室地上,然后倒入甲醛,立馬關(guān)門走人就能夠了。
2天后再開門裝好東西,和往常相同開始工作了。由于2天不能干事,自己細(xì)胞要先方案好,大家都能夠歇息兩天。
18. 咱們實(shí)驗(yàn)室是將細(xì)胞悉數(shù)取出,酒精擦洗培育相,然后用紫外線照耀4小時(shí)以上,污染細(xì)胞悉數(shù)丟掉。還有即是培育室也選用紫外線消毒
19. 我也碰過這個(gè)狀況,是自個(gè)的基礎(chǔ)培育基污染了,光鏡下面能夠看見瓶底有細(xì)細(xì)的黑色小顆粒,但詳細(xì)因素不詳。處理辦法: 1、被污染的細(xì)胞悉數(shù)照過紫外線2小時(shí)以上后丟掉; #p#分頁標(biāo)題#e#
2、同一批的培育基、運(yùn)用的細(xì)胞清洗液等等悉數(shù)從頭濾過消毒(有點(diǎn)舍不得悉數(shù)丟掉,就嘗試了一下,成果證實(shí)是能夠的);
3、翻開培育箱,用75%酒精擦洗,然后用新潔爾滅擦洗(此過程咱們重復(fù)了2次,隔天),用紫外照耀4小時(shí)以上;4、打掃培育室,紫外照4小時(shí)以上,重復(fù)一次;
后來就沒有啦。:)假如污染嚴(yán)重的話,那就要重復(fù)重復(fù)再重復(fù)了。
20. 偶也在年前遇到兩次大迸發(fā),先是真菌后是細(xì)菌。搞得我對(duì)細(xì)胞培育都快失掉決心了,我養(yǎng)細(xì)胞都一年半了,往常細(xì)胞沒啥,感受養(yǎng)細(xì)胞是很簡(jiǎn)單的事,但是當(dāng)污染大迸發(fā)時(shí)真的有招架不住的感受。記住其時(shí)丟掉了簡(jiǎn)直悉數(shù)的細(xì)胞,近一百瓶,就只剩余保種的三兩瓶,寒?。?!**于處理辦法,也即是乳酸熏蒸(記住把培育箱及超凈臺(tái)翻開)以后一星期關(guān)門關(guān)窗,不再進(jìn)培育室,一星期后75%酒精做完全滅菌,也即是用酒精搽培育箱及培育室里的悉數(shù)平面,乃**包含地上。到如今有四個(gè)月了,偶的細(xì)胞一向極好。主張不要慌張,所謂兵來將擋,水來土掩。呵呵呵,悉數(shù)會(huì)好起來的。
21. 看來你要大動(dòng)干戈了。shou要思考培育基的疑問。能夠獨(dú)自放置一瓶培育基到別的的培育箱里培育24小時(shí)看看是不是培育基污染。不過主張仍是悉數(shù)丟掉從頭配置比較好。其次思考培育箱和培育室的疑問。根本上應(yīng)當(dāng)每一個(gè)月將培育箱完全消毒一次的。shou要用75%酒精擦洗,通常的培育箱都是能夠拆開的,將能拆開的有些拆開擦洗后放到烤箱里烘烤(180度5個(gè)小時(shí))。剩余的培育箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈重復(fù)照耀。然后在要用培育箱培育室之前再用紫外燈照耀消毒2小時(shí)。你的相片里顯現(xiàn)的應(yīng)當(dāng)是細(xì)菌污染,咳比較好抵擋。
22. 設(shè)置5%,卻顯現(xiàn)5.1%(當(dāng)然這點(diǎn)差距真實(shí)不算太大,**于顯現(xiàn)HIGH CO2,那是能夠自個(gè)設(shè)定的,你能夠自個(gè)設(shè)定二氧化碳濃度到達(dá)多少時(shí)報(bào)警(也即顯現(xiàn)HIGH CO2,一同也許發(fā)出警鳴音,假如你沒有按MUTE按鈕或平等設(shè)置),同樣地,你能夠設(shè)置下限,還有溫度的上下限),培育箱溫度添加時(shí)CO2濃度會(huì)添加,反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯現(xiàn)的壓力指示是不是超越0.08MPa,長(zhǎng)時(shí)間過高的CO2壓力簡(jiǎn)單損壞培育箱內(nèi)CO2壓力調(diào)理模塊,那樣需求許多銀子修理的。假如狀況進(jìn)一步惡化,主張聯(lián)絡(luò)售后服務(wù)。
23. 手提式紫外燈
24. 1)一個(gè)大準(zhǔn)則是:細(xì)菌和細(xì)胞系統(tǒng)是完全不一樣的,jue不能夠放在一同,通常實(shí)驗(yàn)室均設(shè)置細(xì)菌間、細(xì)胞間,嚴(yán)厲的分隔是成功培育細(xì)胞的確保。2)關(guān)于CO2培育箱的清洗工作,應(yīng)當(dāng)說不難。由于為不銹鋼材,你用0.1%新潔爾滅擦洗潔凈后,在用2%的CuSO4清洗(清霉菌,在CO2條件下霉菌很易生/),**佳用70%乙醇噴霧消毒箱內(nèi)空氣。再?zèng)龈珊?,再底部再?%CuSO4(水稍出現(xiàn)蘭色即可)的滅菌水進(jìn)行安穩(wěn)培育箱,待培育箱溫度和濕度安穩(wěn)后,再用一瓶細(xì)胞預(yù)實(shí)驗(yàn)一下,培育2-3天,沒有疑問再進(jìn)行培育。
25. 有的培育箱能夠直接高溫干烤滅菌的,或許有的金屬架能夠干烤
26. 底部水盤參加蒸餾水后見到一片一片的東西,很也許是細(xì)菌群落的成長(zhǎng)!自己經(jīng)驗(yàn)是,必須清洗,并且是完全清洗潔凈!拆開支架和每層的托盤,包含水盤(留意拆開**佳先向技術(shù)員了解內(nèi)部結(jié)構(gòu),以防誤拆損壞),用碘伏棉球?qū)⑴嘤淅锢锿馔夂筒鸪鰜淼牟考貌?次,然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是,翻開培育箱的門,開紫外照耀過夜,這么就可放心了。我剛回來即是如此弄的,培育的細(xì)胞并沒有感染痕跡,生機(jī)甚佳,供參閱!祝你好運(yùn)!
27. 我運(yùn)用的辦法是:
1 取下培育箱內(nèi)的隔板及掛鉤,用清水清洗潔凈后,75%酒精完全擦洗消毒,然后120度烤箱,考1小時(shí)。
2,培育箱用清水擦洗潔凈后用75%酒精完全擦洗消毒 3,帶無菌手套,安裝好培育箱內(nèi)的隔板及掛鉤 4,翻開培育箱紫外燈照耀30分鐘 5,高壓蒸餾水后參加
咱們一向即是這么做的,作用極好,能夠試試看啊。
28. 彌補(bǔ)一個(gè)水盤消毒的法子∶清水清洗潔凈,75%酒精完全擦洗消毒后,多弄些酒精上去,點(diǎn)火燒一下.作用杠杠的?。?
29. 把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)參加適當(dāng)?shù)臏缇p蒸水或許生理鹽水.再加少數(shù)新潔爾滅,濃度不要緊
30. 水套式,氣套式二氧化碳培育箱。
31. 細(xì)胞成長(zhǎng)的環(huán)境請(qǐng)求有必定濕度,必須加水!我的小經(jīng)驗(yàn)是: 1、雙蒸水裝在5L瓶中,2、高溫滅菌,3、移進(jìn)細(xì)胞培育實(shí)驗(yàn)室,在紫外照耀下冷卻,4、6小時(shí)后,在參加培育箱中運(yùn)用。
假如發(fā)現(xiàn)托盤中的說有白色漂浮物存在是,盡量吸干?。ù宋锼伎际敲咕廴荆? 還有假如有條件,即是定時(shí)75%酒精大清洗!我通常2個(gè)月清洗一次?。ò?xì)胞培育實(shí)驗(yàn)室)
這么在無菌操作下,根本確保你革除污染?。?
32. 培育箱內(nèi)不加水是不規(guī)范的,由于細(xì)胞成長(zhǎng)的環(huán)境請(qǐng)求有必定濕度。 咱們培育細(xì)胞不只經(jīng)常堅(jiān)持有水,并且培育液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關(guān),不會(huì)發(fā)作細(xì)菌污染。
33. 咱們實(shí)驗(yàn)室往常培育箱的消毒辦法:(清洗前**佳開紫外30分鐘) 1、隔板的清洗:先將隔板卸下,用潔凈紗布沾新潔而滅擦兩遍; 2、箱內(nèi)壁用新潔而滅擦洗后再噴75%酒精,關(guān)門熏蒸15分鐘; #p#分頁標(biāo)題#e#
3、盛蒸餾水的盤子:把盤里的水倒掉,用新潔而滅擦洗,干后倒入三蒸水; 4、裝好板后,再噴75%酒精關(guān)門熏蒸30分鐘。 5、培育室開紫外照30分鐘以上。
34. 咱們實(shí)驗(yàn)室是將悉數(shù)隔板卸下,新潔而滅擦洗,放在超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外滅菌,CO2孵箱內(nèi)用紫外燈照耀12h以上。
35. 引薦辦法:拆開隔板,新潔兒滅搽3次,然后酒精搽3次,紫外下面照2小時(shí),然后裝上隔板,箱壁同樣處理,翻開箱子,用小紫外燈或房間紫外燈照2小時(shí)。留意要搽頂部的螺旋槳。裝好后,噴酒精即可。別的,仍是用用硫酸銅比較好,飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽,大概能夠管3-4個(gè)月沒有疑問。如有用,請(qǐng)斑竹加分,謝謝!
36. 加硫酸銅的意圖是為了避免真菌的成長(zhǎng),但硫酸銅簡(jiǎn)單改動(dòng)孵箱pH值,所以主張不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,堅(jiān)持孵箱濕度.
37. 前一段時(shí)刻培育箱里老是有散在的細(xì)胞霉菌污染。培育箱高溫消毒后,如今翻開,發(fā)現(xiàn)里邊那扇玻璃門和墊圈會(huì)有許多水汽,培育瓶外壁也有。請(qǐng)問是怎么回事?細(xì)胞還能養(yǎng)嗎?是由于培育箱門的加熱毛病或設(shè)置過錯(cuò),致使門的溫度與箱內(nèi)溫度不相同,所以引起玻璃門結(jié)水汽。對(duì)細(xì)胞培育沒多大的影響,由于箱內(nèi)的溫度是正常的。
38. 這種狀況很常見,能夠用以下辦法處理:往水盤里的水參加適當(dāng)?shù)牧蛩徙~,拌和均勻即可,由于硫酸銅是重金屬鹽,能夠到達(dá)滅菌作用;別的也能夠加10%的新吉爾滅等無影響性的消毒物質(zhì)。留意,千萬不能直接往水盤里加自來水,由于自來水里有許多潛在的霉菌等,一旦條件溫和它們就會(huì)迅速繁殖,**佳是用煮開的蒸餾水。留意了這些細(xì)節(jié),疑問就方便的解決了